什么是慢病毒包装

发布网友 发布时间：2022-04-20 22:59

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热心网友 时间：2023-07-11 16:16

慢病毒载体（Lentiviral vector, LVs）是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统，它能高效的将目的基因（蛋白质编码序列、shRNA或gRNA）导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链RNA，其基因组进入细胞后，在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA，形成DNA整合前复合体，进入细胞核后，DNA整合到细胞基因组中。慢病毒载体介导的基因表达、RNAi或基因敲除作用持续且稳定，原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中，并随细胞基因组的*而*。另外，慢病毒载体能有效感染并整合到非*细胞中。大量文献研究表明，慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬细胞等。
慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白，免疫原性低，在注射部位无细胞免疫反应，体液免疫反应也较低，不影响病毒载体的第2次注射。
泉州指南针生物提供病毒包装（包括慢病毒包装，腺病毒包装，腺相关病毒包装）等多种包装服务！

热心网友 时间：2023-07-11 16:17

慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1为基础发展起来的基因治疗载体，可以将外源基因或外源干扰序列有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达目的序列的效果。慢病毒具有感染谱广泛特点，并且可以有效感染*和非*细胞。一经感染宿主细胞，慢病毒即利用反转录酶将其RNA转录成双链DNA，随后永久的整合到宿主细胞的染色体中，实现长时间稳定表达。
慢病毒包装是指将慢病毒的包装质粒，包膜质粒以及穿梭载体等一起转入细胞内，在体外组装成病毒的过程。

热心网友 时间：2023-07-11 16:17

慢病毒载体（Lentiviral vector）较逆转录病毒载体有更广的宿主范围，慢病毒能够有效感染非周期性和有丝*后的细胞。慢病毒载体能够产生表达siRNA的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达siRNA/miRNA，实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默，为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能，以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性。慢病毒作为siRNA/miRNA的携带者，不但具备特异性地使基因表达沉默的能力，而且充分发挥了慢病毒载体自身所具备的优势，为基因功能的研究提供了更强有力的工具追问回答不切题 谢谢！

追答慢病毒包装简要步骤慢病毒包装简要步骤慢病毒包装简要步骤慢病毒包装简要步骤：：：： 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1、取1.5ml灭菌EP管，加入1.5µg包装混合质粒和0.5µg表达质粒以及250µl的无血清培养基。轻柔混匀，室温孵育5min。 2、取1.5ml灭菌EP管，取9µl 脂质体LP2000溶于250µl无血清培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。 3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min 4、用胰酶消化并记数293T细胞。用含血清的培养基重悬细胞。 5、在六孔板中每孔，加入1ml含血清的生长培养基，再加入DNA-脂质体复合物。 6、将1ml重悬的293T细胞（1×106个细胞/ml）加入到平板中。37℃CO2孵箱中孵育过夜。 7、移除含有DNA-脂质体复合物的培养基移除，代之以DMEM（含丙酮酸钠和非必须氨基酸）。 7、转染后48-72h收获含病毒的上清。3000 rpm 离心20min，去除沉淀。 8、病毒上清-80°C贮存。 包装出来的慢病毒对NIH/3T3细胞达90%以上感染效率。 注意事项注意事项注意事项注意事项 1.在慢病毒感染细胞前，为检测病毒上清培养液内病毒的活性，并确定病毒与转染细胞之间的比率，需要确定病毒的滴度。病毒的滴度可以通过转染Hela细胞，然后使用抗体筛选稳定的细胞转染株，进行计数和数值统计。 2. 在慢病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合，只有一些较小的慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤

热心网友 时间：2023-07-11 16:18

假病毒是将特定的核酸片段包裹于病毒外壳蛋白内，国外已广泛应用于核酸检测试剂、基因诊断试剂和科研试剂的对照。国内大多数声称假病毒的多为慢病毒，慢病毒仍有感染性；假病毒与慢病毒不同，由MS2噬菌体外壳蛋白包裹外源核酸片段，无感染性，无自主复制能力，生物安全性高，核酸稳定，不易降解。BIODAI 自主研发的假病毒纯化系统，纯度高，无外源未包裹DNA或RNA物质污染; 病毒样颗粒无传染性，不会对实验人员造成伤害，因此生物安全性好； 滴度高，每毫升可达106拷贝；稳定性好，-20℃保存6个月以上RNA不降解。