基于纳米孔测序的mRNA疫苗质量分析新方法,兼顾效率与准确性!

发布网友 发布时间：2024-10-23 04:15

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热心网友 时间：2024-10-23 16:53

2023年的诺贝尔生理学或医学奖颁给了mRNA疫苗技术的两位“功臣”，以表彰他们在mRNA研究领域的突破性发现，加速疫苗开发进程。mRNA疫苗在新冠肺炎大流行期间，以高安全性和有效性展示出应用潜力，不仅限于传染性疾病，还扩展至癌症、自身免疫性疾病等领域。生物制造业的进展，使得数亿剂疫苗的生产成为可能，同时保证了质量和安全性。

在mRNA生产过程中，质量分析至关重要，包括完整性检测和污染物筛查，以确保疫苗的有效性和减少副作用。当前的分析技术，如RT-qPCR、毛细管电泳、凝胶电泳、RP-HPLC、IP-RP-HPLC和免疫印迹，虽然广泛使用，但往往繁琐、昂贵且难以精确检测关键的mRNA质量特征。

昆士兰大学的研究团队在Nature Communications上发表的“mRNA疫苗质量分析用RNA测序”一文，介绍了一种名为VAX-seq的新方法。VAX-seq利用纳米孔测序技术简化了mRNA疫苗和疗法的质量分析，全面检测序列、长度、完整性和纯度。文章还描述了如何通过RNA测序分析mRNA化学，特别是核苷修饰的检测，并提供了一个名为Mana的软件工具，用于自动报告mRNA和质粒模板的质量和完整性。

VAX-seq方法在mRNA疫苗制造的背景下进行了评估，包括从质粒DNA模板的制备、线性化、体外转录到mRNA的纯化。研究中，VAX-seq通过长读长测序（SQK-PCS111）对纯化mRNA进行了分析，确认了序列一致性、长度和完整性，结果显示VAX-seq能够检测mRNA疫苗的长度并定量评估mRNA的完整性。

VAX-seq还能够检测mRNA疫苗中的脱靶RNA，确保mRNA疫苗的安全性和有效性。与短读长测序技术相比，VAX-seq在分析低复杂性序列时显示出更优越的能力，例如准确检测脱靶RNA和反义RNA转录本。

研究团队还评估了直接RNA测序在mRNA疫苗质量分析中的应用，强调了纳米孔测序技术在无需逆转录和扩增的情况下，直接分析单个mRNA疫苗分子中的核苷修饰的潜力。尽管直接RNA测序的产量较低且不支持多路复用，但其在mRNA质量分析中的应用显示出其独特价值。

VAX-seq方法的引入，提供了一种灵敏、定量检测mRNA关键质量特征的手段，适用于mRNA疫苗和疗法在不同制造步骤中的质量检测，从最初的质粒制备到最终产品的表征。该方法只需要少量的mRNA作为输入，能够支持大规模疫苗批次的验证。